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小鼠胰高血糖素樣肽1（GLP-1）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟
發(fā)布時(shí)間： 2014-05-26 點(diǎn)擊次數(shù)： 1263次小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒 Mouse ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit ，規(guī)格：96T/48T，產(chǎn)品別名： 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)檢測試劑盒
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒原理的簡要說明書：GLP-1，胰高血糖素樣肽-1。GLP-1是回腸內(nèi)分泌細(xì)胞分泌的一種腦腸肽，主要作為2型糖尿病藥物作用的靶點(diǎn)。由于GLP-1可抑制胃排空，減少腸蠕動，故有助于控制攝食，減輕體重。胰高血糖素(Glucagon)在糖代謝和體內(nèi)平衡中起重要作用，通過釋放糖原和糖酵解調(diào)節(jié)血糖。作為反調(diào)節(jié)激素的胰島素，當(dāng)血糖升高時(shí)，胰島素可誘導(dǎo)低血糖。胰高血糖素樣肽-1(Glucagon-like peptide-1, GLP-1)是一個(gè)具有強(qiáng)的刺激糖依賴的胰島素釋放的肽，在胃運(yùn)動性和抑制血糖水平上起重要作用。還可能參與外周組織糖的控制，不依賴胰島素的作用。具有促進(jìn)腸上皮生長等作用。GLP-1屬于胰高血糖素家族成員。
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒操作步驟
1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9．在450nm波長處測定各孔的OD值。
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