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小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒
產(chǎn)品時(shí)間:2022-07-19
小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒,國(guó)內(nèi)65%的大學(xué)及科研機(jī)構(gòu),都選擇我們的ELISA試劑盒,我們的ELISA試劑盒簡(jiǎn)便,實(shí)驗(yàn)效果明顯,經(jīng)濟(jì)還環(huán)保。

本產(chǎn)品僅用于科研,不用于臨床

人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒 Human mucosae associated epithelia chemokine,MEC ELISA KitY0003696T/48T
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA Kit Y0003796T/48T
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以下是公司小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒的簡(jiǎn)易說明書:
使用目的:本試劑盒用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中待測(cè)物質(zhì)的含量。
實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入待測(cè)物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的抗原抗體結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度。
試劑盒組成

標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2)加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4)配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6)加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7)溫育:操作同3。
8)洗滌:操作同5。
9)顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10)終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn))。
11)測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié):

計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng):
(1)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
(2)濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
(3)各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
(4)請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
(5)封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
(6)底物請(qǐng)避光保存。
(7)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
(8)所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
(9)本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月

人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒 Human Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit Y0003896T/48T
人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 Human Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit Y0003996T/48T
人腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒Human Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA Kit Y0004096T/48T

 

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